Seamless Bio GmbH (Münchenstein) est le partenaire de distribution exclusif de Cell4Pharma pour la région DACH et livre depuis un stock en Suisse des kits de vésicules membranaires inside-out issues de cellules humaines HEK293 (et non de cellules d’insecte Sf9) : P-gp (ABCB1), BSEP (ABCB11), BCRP (ABCG2), MRP1, MRP2, MRP3, MRP4, MRP5, MRP8 et vésicules de contrôle. Pour les essais d’inhibition et la détermination d’IC50 selon ICH M12, FDA et EMA. 100 réactions par flacon, rapports ATP/AMP minimaux garantis par transporteur, conservation ≥1 an à −80 °C, compatibles radiomarquage, LC-MS/MS et fluorescence. Facturation en CHF, sans dédouanement.
Les transporteurs ABC assurent l’efflux des médicaments et de leurs métabolites à travers les membranes cellulaires ; leur inhibition est liée mécanistiquement aux lésions hépatiques d’origine médicamenteuse (DILI) et aux interactions médicamenteuses (DDI) cliniquement pertinentes.
La FDA, l’EMA et l’ICH M12 recommandent les tests d’inhibition de transporteurs dans la caractérisation DMPK standard. P-gp et BCRP sont obligatoires pour l’évaluation des DDI ; BSEP est le transporteur clé du profil de risque DILI. Comme l’inhibition de plusieurs transporteurs peut cumuler le risque – par exemple BSEP associé à MRP2, MRP3 ou MRP4, qui affecte les voies compensatoires d’efflux des acides biliaires –, un panel complet donne généralement une image du risque plus complète que le seul test BSEP.
Chaque kit est libéré avec un substrat sonde validé et un rapport ATP/AMP minimal défini.
Le rapport ATP/AMP est la mesure pratique de qualité d’un essai de transport vésiculaire : il indique la part de l’accumulation mesurée qui relève d’un vrai transport ATP-dépendant, par opposition à la captation passive et à la liaison non spécifique. Un rapport faible réduit la fenêtre d’essai et augmente la variabilité des IC50.
| Transporteur | Substrat sonde | Rapport ATP/AMP | Pertinence réglementaire |
|---|---|---|---|
| P-gp (MDR1, ABCB1) | Convallatoxine | > 5 | DDI obligatoire (FDA/EMA/ICH M12) |
| BSEP (ABCB11) | Taurocholate (TCA) | > 10 | Évaluation du risque DILI |
| BCRP (ABCG2) | Estrone-3-sulfate (E1S) | > 10 | DDI obligatoire (FDA/EMA/ICH M12) |
| MRP1 (ABCC1) | Estradiol-17β-glucuronide | > 5 | Caractérisation étendue |
| MRP2 (ABCC2) | CDCF | > 20 | Risque DILI (canaliculaire) |
| MRP3 (ABCC3) | Estradiol-17β-glucuronide | > 10 | Efflux compensatoire des acides biliaires |
| MRP4 (ABCC4) | DHEAS | > 5 | Efflux de nucléotides et d’acides biliaires |
| MRP5 (ABCC5) | CDCF | > 3 | Efflux de nucléotides cycliques |
| MRP8 (ABCC11) | DHEAS | > 3 | Études spécifiques d’efflux de principes actifs |
Les vésicules de contrôle issues de cellules HEK293 non transfectées sont disponibles séparément et font partie de chaque série d’essais : le transport ATP-dépendant correspond à la différence entre vésicules transporteur et vésicules de contrôle.
Pourquoi HEK293 plutôt que Sf9 : les transporteurs ABC sont des protéines membranaires glycosylées. Le système d’expression détermine les modifications post-traductionnelles et la composition lipidique de la membrane – deux facteurs qui influencent directement la cinétique de transport. Un système d’expression humain élimine une variable introduite par les cellules d’insecte et fournit des données biologiquement plus pertinentes.
Kits individuels par transporteur, à choisir selon votre panel d’étude. Offres de volume et offres de panel complet sur demande.
Tous les kits sont livrés depuis notre stock en Suisse, sans dédouanement, avec facturation en CHF par Seamless Bio GmbH, Münchenstein. Pour les CRO, entreprises pharmaceutiques et instituts de recherche suisses, les formalités douanières disparaissent entièrement.
Chaque kit est livré avec ses données d’activité spécifiques au lot (CoA). Sur demande : fiches techniques, données de validation et protocoles d’essai. Pour les programmes de criblage en cours, nous recommandons une réservation de lot.
Pas d’essai en interne ? Un service complet d’essais sur panel de transporteurs est disponible via notre réseau de partenaires, y compris le service sur ciPTEC pour les transporteurs rénaux. →
Quels transporteurs sont obligatoires selon ICH M12, FDA et EMA ?
P-gp et BCRP sont les transporteurs d’efflux obligatoires pour l’évaluation des DDI selon la guidance FDA (2020), la ligne directrice DDI de l’EMA et l’ICH M12. BSEP est évalué séparément pour le profil d’hépatotoxicité (risque DILI) – pas comme transporteur DDI obligatoire, mais attendu réglementairement pour les substances à excrétion hépatique ou à potentiel d’interaction avec les acides biliaires.
Pourquoi HEK293 plutôt que des cellules d’insecte Sf9 ?
Les transporteurs ABC sont des protéines membranaires glycosylées de mammifères. Le système d’expression influence la glycosylation et la composition lipidique de la membrane, donc la cinétique de transport et la sélectivité des substrats. Les cellules HEK293, d’origine humaine, fournissent des données de transport plus proches du contexte in vivo.
Les kits sont-ils compatibles avec toutes les méthodes de détection ?
Oui : radiomarquage (³H, ¹⁴C), LC-MS/MS et fluorescence. Le choix dépend du substrat, de l’infrastructure disponible et des exigences du dépôt réglementaire.
Qu’est-ce que le rapport ATP/AMP et pourquoi est-il important ?
Il indique la part de l’accumulation vésiculaire qui relève d’un vrai transport ATP-dépendant, par rapport à la diffusion passive et à la liaison non spécifique. Un rapport élevé signifie une large fenêtre d’essai et une faible variabilité des IC50 ; un rapport faible peut conduire à des données d’inhibition faussement négatives. Tous les kits Cell4Pharma sont libérés avec des rapports minimaux garantis par transporteur.
Quelle est la durée de conservation des kits ?
Au moins 1 an à −80 °C à partir de la date de fabrication. La date exacte figure sur le CoA spécifique au lot.
Ai-je besoin de vésicules de contrôle pour chaque essai ?
Oui. Le transport ATP-dépendant est défini comme la différence d’accumulation entre vésicules transporteur (condition ATP) et vésicules de contrôle (condition AMP) ; cette comparaison sert de base au calcul de l’IC50. Les vésicules de contrôle se commandent séparément.
Puis-je obtenir un flacon d’essai ?
Oui, sur demande. Indiquez le transporteur et la méthode de détection, afin que nous joignions le kit et le protocole adaptés.
Comment se passe la livraison en Suisse ?
Les kits sont expédiés depuis notre stock suisse à Münchenstein – sans dédouanement, avec facturation en CHF. Pour les besoins urgents, contactez-nous directement : nous coordonnons l’envoi avec votre laboratoire.
Indiquez-nous votre panel et votre méthode de détection – nous confirmons la disponibilité des lots en Suisse et joignons un flacon d’essai sur demande.